气相色谱-三重四极杆质谱法测定辣椒中咪鲜胺及其代谢物残留量

吴晓娜，董 娟，董雪峰

(聊城市食品药品检验检测中心，山东聊城 252000)

摘 要：目的：建立气相色谱-三重四极杆质谱法测定辣椒中咪鲜胺及其代谢产物2,4,6-三氯苯酚残留的分析方法。方法：样品采用QuEChERS方法进行前处理，以气质联用仪多反应监测(MRM)进行测定，优化质谱检测条件，采用外标法定量。结果：咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚在0.1～2 μg/mL范围内线性关系良好，定量限分别为0.006 6 mg/kg和0.000 4 mg/kg，在低、中、高3个不同添加水平下，咪鲜胺的平均回收率在91.9%～118.3%，相对标准偏差在1.82%～6.95%;2,4,6-三氯苯酚的平均回收率在85.1%～118.0%，相对标准偏差在1.22%～7.64%。结论：建立的气相色谱-三重四极杆质谱法灵敏度高、准确度和精密度良好，可用于辣椒中咪鲜胺及其代谢物残留量的检测。

关键词：GC-MS/MS;咪鲜胺;2,4,6-三氯苯酚;辣椒

咪鲜胺是一种被广泛使用的咪唑类杀菌剂，主要的作用机理是抑制细胞膜的重要成分麦角甾醇的生物合成，从而达到铲除病害的目的[1]，它广泛用于大田作物、水果蔬菜及各种经济作物病害的防治[2]，其对于辣椒的枯萎病也具有很好的防治效果[3]。通过对咪鲜胺的大量研究，普遍认为咪鲜胺在进入环境后最终会降解成2,4,6-三氯苯酚[4-5]，而2,4,6-三氯苯酚的毒性较强，且不易降解，对环境安全会造成潜在隐患。目前对于咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚的检测方法，样品的前处理不仅复杂烦琐，而且还会用到毒性较大的吡啶盐酸盐，不利于检验人员的健康和环境的安全。本文通过研究构建了QuEChERS-气相色谱-三重四极杆质谱法测定辣椒中咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚残留的方法，处理过程简单快速，并具有较高的灵敏度和选择性。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

乙腈、丙酮、醋酸、无水硫酸镁、氯化钠、PSA、C18、咪鲜胺标准品(北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司，标准物质编号：GBW(E)081565，浓度100 μg/mL)、2,4,6-三氯苯酚标准品(北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司，标准物质编号：SB05-059-2008，浓度100 μg/mL)。分析中所有试剂为分析纯试剂，水为一级水。

1.2 仪器与设备

7890B-7000C气相色谱-三重四极杆质谱联用仪(AgilentTechnologies)、±0.01 g电子天平、均质器、离心机和氮吹仪。

1.3 仪器条件

(1)色谱条件。色谱柱：VF-1701MS石英毛细管柱(30 m×0.250 mm×0.25 μm);柱箱程序升温：40 ℃保持

1 min，然后30 ℃/min升温至130 ℃，再以5 ℃/min升温至250 ℃，10 ℃/min升温至300 ℃保持5 min;进样口温度：280 ℃;碰撞气为氮气，载气为氦气，纯度≥99.999%;流速：1.2 mL/min;进样量1 μL;进样方式为不分流进样。

(2)质谱条件。离子源温度：230 ℃;传输线温度：280 ℃;电离方式：EI;溶剂延迟：5 min;测定方式：多反应监测。

1.4 方法

称取15 g试样于50 mL离心管中，加入15 mL 1%醋酸乙腈溶液进行均质提取，在离心管中加入盐(6 g无水硫酸镁，2 g氯化钠)，迅速混匀，涡旋振荡1 min，4 000 r/min离心5 min。吸取离心结束的上清液8 mL进行净化处理，加入净化剂(1 500 mg硫酸镁，400 mg PSA及400 mg C18)，涡旋振荡1 min，4 000 r/min离心5 min。吸取净化完的溶液2 mL于离心管中，进行浓缩，氮吹至近干，加入1 mL丙酮复溶，过滤膜，上机。

2 结果与分析

2.1 质谱条件的优化

对咪鲜胺以及2,4,6-三氯苯酚标准溶液进行全离子扫描。选择碎片中丰度比较高的碎片离子作为定性定量母离子。咪鲜胺母离子碎片为：180(定量离子)、196(定性离子);2,4,6-三氯苯酚母离子碎片为：196(定量离子)、132(定性离子)。检测在不同碰撞能量下，母离子碎片的碰撞情况，得到母离子-子离子对，表1为优化后的母离子-子离子对。

2.2 咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚定性、定量离子图谱

图1和图2为优化质谱条件下咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚的定性、定量离子图谱。

2.3 建立基质校正曲线

吸取一定量的2,4,6-三氯苯酚和咪鲜胺标准溶液，以净化后的辣椒基质溶液为溶剂，配制基质混合标准溶液使其终浓度为0.1 μg/mL、0.2 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL。绘制标准曲线得到线性回归方程，结果见图3和图4。2都在0.999以上，表明咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚在0.1～2 μg/mL范围内线性关系良好。以10倍信噪比计算方法的定量限(/=10)，咪鲜胺为0.006 6 mg/kg，2,4,6-三氯苯酚为0.000 4 mg/kg。

2.4 回收率和精密度的测定

对辣椒样品进行3水平，6平行实验，选择低、中、高3个不同浓度进行加标实验。计算加标回收率以及精密度，结果见表2。

咪鲜胺的平均回收率在91.9%～118.3%，相对标准偏差在1.82%～6.95%;2,4,6-三氯苯酚的平均回收率在85.1%～118.0%，相对标准偏差在1.22%～7.64%。结果表明该方法具有较好的回收率及精密度，能够满足辣椒中咪鲜胺及代谢物残留量的检测。

3 结论

本文建立了辣椒中咪鲜胺及其代谢产物2,4,6-三氯苯酚残留量的检测方法。通过操作简单的QuEChERS前处理方法，利用气相色谱-三重四极杆质谱仪对咪鲜胺及其代谢产物2,4,6-三氯苯酚残留量进行了定性和定量分析。避免了复杂烦琐的前处理程序以及毒性试剂的使用。通过该方法检测，咪鲜胺和2,4,6-三氯苯酚的定量限分别为

0.006 6 mg/kg和0.000 4 mg/kg，检测灵敏度高;绘制的5个点的浓度曲线，线性良好;在3个不同添加水平下，均获得了良好的回收率。因此，可采用该方法检测辣椒中咪鲜胺及其代谢物2,4,6-三氯苯酚残留量。

参考文献

[1]卢俊文,李蓉,杨芳,等.气相色谱-串联质谱法快速测定水果中咪鲜胺及其代谢物2,4,6-三氯苯酚的残留量[J].食品科学,2015,36(12):213-217.

[2]高洁,胡德禹,张钰萍.咪鲜胺及其代谢产物在橙汁中的残留检测方法研究[J].农药科学与管理,2011,32(6):35-39.

[3]洪艳霞.咪鲜胺与异菌脲混配对辣椒枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的增效作用[J].山西农业科学,2016,44(3):382-384.

[4]龚道新,樊德方,杨仁斌,等.咪鲜安及其主要代谢物的紫外光谱吸收特性和对蝌蚪急性毒性的研究[J].农业环境科学学报,2003(6):749-753.

[5]陈平,柳训才.咪鲜胺的应用概况及其残留检测研究[J].湖北农业科学,2007(3):478-480.