包装饮用水中微生物快速检测的必要性分析

□ 上海博尔卡国际贸易有限公司 供稿

根据我国《食品安全国家标准 包装饮用水》(GB 19298-2014)的描述，包装饮用水是指“密封于符合食品安全标准和相关规定的包装容器中，可供直接饮用的水”，例如人们非常熟悉的桶装水和瓶装水。

我国包装饮用水的行业现状

近年来，包装饮用水在人们日常生活中出现的频次越来越高。随着经济的发展与城镇化进程的加快，部分城市和地区的人口密度逐步增大，导致当地公共给水有时难以满足人们工作与生活中日益增长的用水需求。因此，包装饮用水行业在近十年里获得了快速发展。据有关资料显示，2011年全国包装饮用水类总产量近4789万吨，2012年约5562.8万吨，2015年为8766.09万吨，2017年则达到9535.73万吨，行业产值年均增长率虽有起伏，但大都在保持在20%左右。尽管近两年由于人口增速放缓而使该行业的增速受到影响，但是2018年的行业市场规模依然达到1397.82亿元。

图1 COMPASS®CC 琼脂使用步骤图解

微生物指标不合格成为包装饮用水行业发展的新桎梏

在如此庞大的消费市场下，包装饮用水的安全问题也逐渐呈现在各方面前。2014年，原国家食品药品监督管理总局(现国家市场监督管理总局)曾对全国范围内的瓶/桶装饮用水进行了专项抽检，共抽检样品1863批次，涉及全国31个省(区、市)的1197家生产企业，抽检项目包括菌落总数、致病菌、铅、镉、亚硝酸盐、溴酸盐等36项。检测结果显示，共有444批次不合格样品，抽检不合格率达23.83%，涉及22项不合格项目，主要包括菌落总数、大肠菌群等微生物指标和溴酸盐超标等。其中，微生物指标不合格的样品大多来自桶装水。

据了解，抽检不合格的原因来自多个方面。其一，因为自然水源被污染导致饮用水未达到相关要求的现象相当普遍。据水利部官方数据显示，2013年我国达不到饮用水源标准的四类、五类及劣五类水体在河流、湖泊、水库、省界水体及地下水中的占比分别高达31.4%、68.1%、18.6%、37.7%及77.1%。另一方面，与其他食品行业相比，包装饮用水，尤其是桶装水的生产成本较低，小微企业众多，从业者的专业水平良莠不齐。在多种因素的共同作用下，包装饮用水行业的健康发展受到了严重制约。

微生物指标是衡量食品安全的重要指标，大肠菌群超标则是包装饮用水中最为常见且突出的问题之一。如果人们直接饮用微生物超标的饮用水，会导致身体不适、呕吐、腹泻，严重危害人体健康安全。对于消费者来说，包装饮用水的质量难以直接从外观、口感上辨别，因此检测环节尤为重要。

国家标准对包装饮用水检测的相关规定

为了保障人民群众的饮水安全，我国相继出台了包装饮用水的生产检验相关标准，如《瓶装饮用纯净水》(GB 17323-1998)、《食品安全国家标准 包装饮用水》(GB 19298-2014)、《食品安全国家标准 包装饮用水生产卫生规范》(GB 19304-2018)等，并规定了大肠菌群、铜绿假单胞菌等的检测方法和限量要求。

以大肠菌群的检测为例，依据《食品安全国家标准 包装饮用水》(GB 19298-2014)的要求，检验方法应采用《食品国家安全标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》(GB 4789.3)平板计数法。该方法建立在大肠菌群发酵乳糖的能力和相应产酸能力的基础上，需要对VRBA平板上的典型菌落进行证实试验，故检测时间相对较长，且对检测人员的专业素养要求较高。包装饮用水尤其是桶装饮用水中不含任何防腐剂，微生物的存在、繁殖与否依赖于生产质量控制的严格程度，因此从生产到运输的周期不宜过长。此外，包装饮用水也存在出厂时合格，却由于包装密封性不达标、储运和销售时间过长等原因造成的微生物污染现象。这就要求相关企业在必要时使用一些快速、精确的检测手段对饮用水产品进行预检，争取第一时间对产品质量进行把控，从而满足生产企业快速周转的需求。

图2 大肠埃希氏菌典型菌落呈蓝色至蓝紫色

微生物快速检测解决方案，助力企业严把质量关

针对水质产品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌的检测，Biokar Diagnostics公司所提供的COMPASS® CC琼脂快速检测方法可以在24小时内通过膜过滤法计数水中的大肠菌群和大肠埃希氏菌，无需后续确认即可直接出具报告，大大缩短了检测时间和检测流程。

据了解，COMPASS® CC琼脂是一款表现出色的显色培养基，具备选择性和特异性高、操作简便、检测时间短等优点。同时，优异的蛋白胨混合物有利于大肠埃希氏菌和大肠菌群的生长，其中特制的选择性成分还可以抑制潜在的干扰微生物群。

经过培养，属于大肠菌群的细菌会产生半乳糖酶，其将与发色底物混合物反应形成粉红色的沉淀物，因此大肠菌群在COMPASS® CC平板上表现为粉红色菌落。大肠埃希氏菌则因为本身除β-半乳糖苷酶活性外还具有β-葡萄糖醛酸酶(GUD)活性，这两种酶同时作用致使大肠埃希氏菌菌落呈现蓝色至蓝紫色，二者清晰可辨。

COMPASS® CC琼脂操作简便，仅需3步即可完成检测，具体使用步骤如下：

①通过无菌过滤膜过滤一个预先确定体积(如250mL)的样本进行测试;

②在平板表面沉积滤膜，过滤面与琼脂表面紧密接触，在36±2℃下培养24±3小时;

③计数特征菌落并报告结果。

图3 其它大肠菌群典型菌落呈粉红色

如图2、图3所示，琼脂表面出现的菌落可直接进行计数，无需接种BGLB肉汤培养确认。此外，COMPASS® CC琼脂适用范围广泛，既可用于公共给水的水质控制，也可用于非公共给水(矿泉水、井水等地下水)，甚至是存在高浓度干扰菌的饮用水源的检测。

图4 Biokar Diagnostics快速检测解决方案

作为饮用水微生物检测的“行家”，COMPASS® CC琼脂的质量和性能也值得信赖——Biokar Diagnostics公司在COMPASS® CC琼脂产品完成之初就积极推进AFNOR(法国标准协会)认证，目前已经成功获得AFNOR证书。作为完全独立的欧洲认证系统，AFNOR认证评审委员会的要求非常严格，按照ISO 16140的相关要求，该产品在验证期间对不同类型水样的189个样品进行了分析，共计使用了21种大肠埃希氏菌菌株、24种除大肠埃希氏菌以外的大肠菌群菌株和32种干扰菌株，均取得了令人满意的效果。

关于Biokar Diagnostics公司：

Biokar Diagnostics公司成立至今已有40余年，并一直专注于研究和生产微生物检测相关产品。目前，该公司用于微生物方面的产品达300余种(包括饮用水中铜绿假单胞菌检测用培养基)，业务遍及40余个国家。

当前，Biokar拥有通过AFNOR认证的快速检测方法，包括对单增李斯特氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌等致病菌的检测。公司的所有产品均严格遵循标准，其产品质量和解决方案赢得了国际声誉。未来，Biokar还将继续致力于致病菌快速检测相关产品的持续开发,进而满足食品安全检测用户不断增长的业务需求。