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试论HPLC法测定不同品种鸡蛋中的胆固醇含量

2020-11-27 14:11:58 来源: 食品安全导刊

  试论HPLC法测定不同品种鸡蛋中的胆固醇含量
  
  借助于HPLC法对不同种类鸡蛋里面的胆固醇含量进行有效测定,本文以浓度为2.0mol/L的KOH-乙醇溶液开展皂化,石油醚萃取,以C18反相色谱柱进行分离,HPLC法测定,对操作环节进行了简化,减少了试剂的总体使用量,并且进一步节省了探究时间,整个探究过程只需要1.5小时。本方法用来测定实际样品,效果明显。
  
  胆固醇是生物膜以及神经髓鞘的核心构成部分,而且是胆汁酸以及类固醇激素的前体。可身体内部太多的胆固醇会进一步引起高血脂等疾病,于是,人们需要对日常饮食中胆固醇的摄入量进行控制。鸡蛋是人体进一步摄入胆固醇的核心渠道。HPLC法对蛋黄里面胆固醇的具体含量进行测定,操作快速、方便,在短期内就能够完成探究,能够满足快速探究以及大批量样品测定的双重需要。
  
  材料与方法
  
  仪器与试剂。Agilentl100化学工作站,紫外检测器G1314A,Agilent 1100高效液相色谱仪,异丙醇、乙腈、甲醇、石油醚、胆固醇、氯化钠、氢氧化钾以及无水乙醇。制定浓度为1.0mg/ml的胆固醇溶液:将100mg胆固醇放在100ml的容量瓶里面,以少量甲醇进行溶解后,用甲醇稀到刻度。
  
  样品处理以及测定。将称好的0.20g鸡蛋放在50ml的具塞比色管里面,添加5.0ml浓度为2.0moL/L的KOH一乙醇液,进行充分振荡,放在65℃的水浴里面实施皂化30分钟后取出,利用流动的水实施冷却,添加2.0ml的饱和氯化钠溶液后,然后添加20.0ml的石油醚,旋涡混合均匀后开展离心分离,将10.0ml的上清液放进10ml刻度的比色管中,通入氮气进行吹干,再采取1.0ml甲醇对残渣进行有效溶解,过0.45μm滤膜之后,将10.0μl有效添加到液相色谱仪,根据以上色谱条件有效实施测定,外标法定量。
  
  结果
  
  线性范围以及方法的最低检出限。按照探究步骤对胆固醇的标准溶液进行配制,在本实验的背景下,胆固醇的浓度从0至1.0mg/ml范围,标准曲线进一步呈现优良的线性关系。检出限低至0.005mg/ml,如果取样1.0g,鸡蛋里面胆固醇的最低检出浓度是0.5mg/100g。
  
  准确度以及精密度试验。在0.20g的鸡蛋样品里面依次添加0.15、0.30以及0.45mg的胆固醇标准,操作方法与样品一致,获得的回收率如表1所示。由表1能够得知,本实验的测定结果是真实的,其平均回收率是92.1%,各种浓度的测定结果的误差都不超过5%。
  
  
  
  
  鸡蛋测定。借助于HPLC法对购买的10份鸡蛋样品有效实施了测定,结果胆固醇含量依次在(180至545)mg/100g之间。
  
  结论
  
  第一,现如今,在借助于比色法以及HPLC法进一步测定鸡蛋中胆固醇含量的过程中,一般需要对样品实施皂化操作以及若干次提取,以减少蛋黄里面其他成分带来的影响,操作复杂且耗时,一般需要很多个小时才可以测定完一个样品,不适合快速检测大批量的样品。
  
  第二,实验结果进一步表明,不同种类鸡蛋的胆固醇含量有所区别,于是对不同种类鸡蛋的胆固醇含量的相关参考值进行测定,有利于充分指导当地城市居民的合理膳食。
  
  马丹霞 广州检验检测认证集团有限公司

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