饮料中维生素C含量的测定

□ 周宁菱 景德镇市市场和质量监督管理综合检验检测中心

摘　要：本文采用高效液相色谱-二极管阵列器法(HPLC-PDA)测定8种饮料中维生素C(VC)含量，并探讨了开盖后环境温度和放置时间对VC含量的影响。结果表明，8种饮料中VC含量的范围为52.3±1.3mg/L~494.6±0.5mg/L(N=3)，不同品种间的VC含量相差较大。开盖后，环境温度的升高或放置时间的延长均会导致VC含量显著降低，因此建议含VC的饮料开盖后尽快饮用完，若有剩余，应进行冷冻储存。

关键词：饮料 高效液相色谱法 维生素C

维生素C(VC)又称抗坏血酸，是人体生长发育及维持健康不可缺少的营养物质，但是人体内不能贮存VC，同时自身也无法合成VC，且人体若严重缺乏VC易引起坏血病[1]。中国营养学会推荐的成人每日VC摄入量为100mg，最高为1000mg，摄入过多或过少都会引起身体的病变，故了解日常饮食，如各种饮料中的VC含量十分必要。

目前，定量VC的方法有2,6-二氯靛酚钠法[2]、碘量法[3]、分光光度法[4]和高效液相色谱法(HPLC)[5]等。本文选择高效液相色谱-二极管阵列检测器法(HPLC-PDA)[6]测定常见饮料中VC的含量，此法根据不同物质有不同光谱的特性来定性，通过峰面积来定量。本实验以8种不同品牌的饮料为检测样本，对其VC含量进行测定，并讨论开盖后环境温度和放置时间对VC含量的影响，以期为人们科学补充VC提供参考建议。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪：Waters e2695型(配置Waters 2998型二极管阵列检测器)、超纯水机(Millipore EXPRESS40)、紫外分光光度计(岛津UV 2550型)、VC标准品(中国食品药品检定研究院)。

1.2 方法

1.2.1 样品中VC的测定方法

采用HPLC-PDA法测定饮料中的VC含量[6]，色谱条件分别是：色谱柱为ODS C18柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为0.1%醋酸溶液，流速为1.0mL/min，柱温为28℃。

1.2.2 标准曲线的绘制

精密称取25.00mg VC标准品，用超纯水定容于100mL棕色容量瓶中，配制成250mg/L标准溶液，分别精密量取不同体积的250mg/L VC标准溶液，配制成200mg/L、150mg/L、100mg/L、50mg/L、10mg/L的VC标准系列溶液。

1.2.3 样品中VC含量的测定

在超市购买不同品牌的不同种饮料，分别有绿茶(编号1、2)、红茶(编号3)、功能饮料(编号4)、茉莉茶(编号5)、橙汁(编号6、7)、果蔬汁(编号8)。吸取适量经不同处理后的样品，经0.45μm针头过滤，待测。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

在200~400nm范围内测定VC标准溶液的紫外吸收光谱图(见图1)，由图1可知，VC在243nm处有最大吸收，故选择243nm作为检测波长。

2.2 标准曲线及线性范围

在1.2.1的色谱条件下，吸取不同浓度的VC标准溶液进样分析。VC标准溶液的高效液相色谱图(见图2)，再以标准溶液浓度(mg/L)为横坐标，峰面积(微伏×秒)为纵坐标，绘制标准曲线。从图3可知，VC线性回归方程为y=53278x-263819，R2=0.999，线性关系良好。

2.3 常温下8种饮料中VC含量的比较

在1.2.1的色谱条件下测定8种饮料中的VC含量(见图1和表1)。从表1可知，被测定的8种饮料中，VC含量最高的是茉莉花茶，为494.6±0.5mg/L(N=3);最低的是功能性饮料，为52.3±1.3mg/L(N=3)，前者是后者的9倍。不同饮料中含有的VC含量差值较大，李仪等[7]也有类似结果。同一品种饮料之间VC含量也相差较大，如编号1的绿茶是编号2的2.0倍，编号7的橙汁是编号6的4.7倍。

另外，编号8的果蔬汁VC检测含量为0，在色谱图中未出现目标峰，利用二极管也排除了其他峰为目标峰的可能性。同时，经不同后续处理的果蔬汁中也未检测出VC，但果蔬汁的配料表中显示为添加了VC，这可能是因为果蔬汁内还有较多的果肉，样品前处理方法不能简单的过滤处理，具体原因还有待于深入研究。

2.4 开盖后放置时间对VC含量的影响

将8种饮料开盖取样后，拧紧瓶盖，置于常温下，分别于12h和24h后各取样一次，各饮料中VC含量变化结果见表1。从表1可知，开盖12h后，VC含量降低了16.2%~52.2%，而茉莉花茶只降低了6.1%;开盖24h后，VC含量降低了30.8%~66.4%，茉莉花茶为16.3%，因此建议饮料开盖后尽快饮用。

2.5 开盖后温度对VC含量的影响

将8种饮料开盖后，分别于0℃冷冻12h、常温放置12h、45℃水浴12h、65℃水浴12h，经不同处理后的饮料中VC含量见表2。从表2可知，经0℃、常温、45℃和65℃放置12h，各饮料中VC含量变化分别是8.5%~24.6%、16.2%~52.2%、44.0%~79.7%和47.4%~81.6%，但茉莉花茶中VC含量变化不大。可见，随着温度升高，饮料中VC含量大幅下降，因此不建议将饮料加热饮用，若有剩余，可放于冰箱中冷冻。

3 结论

目前，市场上销售的饮料品种繁多，VC也已被添加在各类饮料中，测定饮料中VC的含量可为人们的每日VC摄入量提供参考。本文通过HPLC-PDA法对8种饮料中VC的含量进行测定，同时探究了开盖后环境温度和放置时间对各饮料中VC含量的影响。结果表明，开盖后随着环境温度的升高或放置时间的延长，饮料中的VC含量均出现了显著的降低。因此，饮料开盖后建议尽快饮用完，若有剩余，可置于0℃冷冻;高温更易加快VC的流失，尽量不要加热饮用。

参考文献：

[1] 连予生，梁洁红，邓秀琼，等.维生素C在橙汁饮料中的稳定性[J].食品工业，2000，2:14-15.

[2] 李书静，可李，姚新建，等.2,6-二氯靛酚钠法测定果汁饮料中的维生素C[J].光谱实验室，2011，28(5):2391-2394.

[3] 李仪，王盘江，莫韵娴，等.市售果汁饮料中维生素C含量的测定[J].广东化工，2016，43(19):182-184.

[4] 蔡顺香.紫外分光光度法测定芦柑中的还原型维生素C[J].光谱实验室，2009，26(5):1091-1094.

[5] 吴昊，刘燕，李晓明，等.亲水高效液相色谱法测定饮料中的维生素C含量[J].中国食品添加剂，2015，11:169-172.

[6] 单胜艳，群单，王春茹，等.高效液相色谱法测定茶饮料中的维生素C[J].饮料工业，2013，16(8):29.

[7] 李仪，王盘江，莫韵娴，等.市售果汁饮料中维生素C含量的测定[J].广东化工，2016，43(9):182.